ELISA

Z Test ELISA je lékařské laboratorní vyšetření, které má za následek takzvanou reakci antigen-protilátka. Lze testovat různé antigeny, které hrají roli v humánním nebo veterinárním lékařství. V Německu jsou k provedení zkoušky pověřeny pouze akreditované laboratorní ústavy.

Co je to postup?

Test ELISA je jednou z tzv. Imunologických metod v rámci lékařských laboratorních testů. Zkušební postup lze použít k detekci proteinových molekul v široké škále tělních tekutin.

ELISA je zkratka pro Enzymový imunologický sorbentový test. Jedná se tedy o název anglického jazyka, ale v německém lékařském použití se prosadil.

Test ELISA je jednou z tzv. Imunologických metod v rámci lékařských laboratorních testů. Zkušební postup lze použít k detekci proteinových molekul v široké škále tělních tekutin. Detekce těchto molekul zase umožňuje vyvodit závěry o určitých nemocech nebo klinických obrazech, a proto lékaři také činí jejich diagnózu závislou na výsledku takového testu ELISA. Zkušební postup je proto v každodenní klinické praxi velmi důležitý, ambulantní nebo hospitalizovaný.

Odpovídající tělesné tekutiny, například plná krev nebo tekutiny z kloubů, jsou posílány přímo do laboratoře poté, co byly odebrány pacientovi. Vzorky jsou obvykle velmi naléhavé, protože původní materiál je považován za citlivý a měl by být vyšetřen co nejdříve. Takzvané obložené vzorky mohou vést k falešně negativním výsledkům, protože patologické proteiny, které mají být detekovány, se mezitím snížily nebo úplně rozložily. V testu ELISA hraje důležitou roli tzv. Předběžná analýza, podezřelé nebo negativní výsledky by se měly znovu opakovat, pokud existují klinické příznaky.

Funkce, účinek a cíle

Zkumavky a tzv. Mikrotitrační destičky jsou nezbytné pro správné testování v akreditované lékařské laboratoři. Tyto destičky s jemnými polokonkávními prohlubněmi jsou vyrobeny ze speciálního plastu a každá je potažena velmi specifickou protilátkou.

Pokud je antigen, který má být detekován, přítomen v tělní tekutině, která má být vyšetřena, dochází ke specifické reakci antigen-protilátka podle takzvaného principu zámku a klíče. Laboratorní personál může vstoupit do vzorků do misek ručně nebo pomocí pipet nebo zcela automaticky. V moderních lékařských laboratořích se pro diagnostiku ELISA používají pouze plně automatizované systémy.

Musí však být sledovány vyškoleným personálem, lékařsko-technickými pomocníky laboratoře. Za tzv. Vnitřní a vnější kontrolu kvality je také odpovědný pracovník laboratoře, nadřízený zdravotnickému personálu pro laboratorní medicínu, epidemiologii infekce a mikrobiologii. Po prvním pokusu, tj. Poté, co byl materiál pipetován na destičky, se specifické antigeny ve vzorku, pokud jsou přítomny, již navázaly na protilátky na plastové desce.

Poté následuje promývací cyklus fyziologickým roztokem, aby se odstranily rušivé faktory, jako jsou nežádoucí antigeny nebo proteiny ze šarže. Tento krok je velmi důležitý, aby se zabránilo falešně pozitivním reakcím. Údajně pozitivní výsledek nesprávně interpretovaný laboratoří může mít za určitých okolností pro pacienta fatální následky. Ve druhém kroku výzkumu se přidá další protilátka, která je spojena s enzymem. Tato značená protilátka se také váže na antigen.

Ve třetím a posledním kroku je přidáno speciální barvivo v definovaném množství, které je ve větší či menší míře rozloženo zbývajícími enzymatickými zbytky. Může se rozkládat pouze ten enzym, který předtím nebyl navázán na antigen společně s protilátkou. Volný enzym je schopen štěpit přidané barvivo. Přesné množství štěpeného barviva může být stanoveno další lékařskou laboratorní metodou, takzvanou fotometrií. To umožňuje vyvodit přesný závěr, zda a kolik antigenu je přítomno ve vzorku.

Test ELISA se používá nejen k počáteční diagnóze nebo k doložení podezření na diagnózy u některých chorob a klinických obrázků, ale také ke sledování jejich postupu. Pokud se koncentrace antigenu v testu během léčby sníží, je terapie považována za úspěšnou.

Zde najdete své léky

➔ Léky na posílení obranného a imunitního systému

Rizika, vedlejší účinky a nebezpečí

Test ELISA je zejména informativní díky detekci antigenních struktur v tělesných tekutinách. Test umožňuje tzv. Kvalitativní, ale také semikvantitativní a kvantitativní vyjádření o předpokládané přítomnosti určitých antigenů v tělesných tekutinách.

K vyšetření nelze použít celou krev, pouze krevní sérum. Přímý test na pacientovi, například z kapilární krve prstu, proto není, stejně jako u některých jiných sérologických testů, dosud možný. V humánní medicíně se test ELISA používá především k detekci antigenů bakteriálních, virových nebo mykotických infekcí. Kromě toho jsou všechny pozitivní výsledky sérologie hepatitidy znovu kontrolovány testem ELISA jako standardem.

Určité hormony, jako je těhotenský hormon HCG, lze také stanovit testem ELISA. Pokud se během těhotenství vyskytnou určité komplikace, je přesná znalost koncentrace těhotenského hormonu v krvi velmi diagnosticky a terapeuticky velmi užitečná. Další oblastí indikace pro test je detekce takzvaných paraproteinů v moči, k nimž dochází například u různých nádorových onemocnění, jako je mnohočetný myelom.

Test ELISA je dnes stále prováděn v mnoha laboratorních ústavech, odborníci jej však považují za zastaralý. Imunitní reakce spojená s enzymy v testu ELISA byla v posledních letech stále více nahrazována radioaktivně značenými protilátkami, které poskytují ještě lepší kvantitativní výsledky. Tyto testy jsou také známé jako RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Dalším specifickým dalším vývojem testu ELISA jsou lehce chemické metody, jako je luminiscence nebo fluorescence.